TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)們克服了許多活細胞成像中的困難。所有技術(shù)的核心就是Ti,擁有這款強有力的新型倒置顯微鏡,您可以在尼康CFI60®光學(xué)系統的幫助下輕松使用上述技術(shù)。Ti系列共有三種型號,改進(jìn)的系統速度,提升的靈活性和高效多模式特點(diǎn)使Ti成為用于高端研究和活細胞成像的理想系統。
1、自動(dòng)焦點(diǎn)校正系統實(shí)現穩定時(shí)間序列成像
Ti-E具備尼康獨特的完美對焦系統(PFS,Perfect Focus System),此系統具備在長(cháng)時(shí)間時(shí)間序列成像過(guò)程中實(shí)時(shí)自動(dòng)校正焦點(diǎn)漂移的功能。無(wú)論是由于溫度變化還是外部機械震動(dòng)而引起的焦點(diǎn)漂移都可完美校正。此系統同時(shí)具備自動(dòng)確認焦點(diǎn)的實(shí)用功能。
EB1 and tubulin in the cortex of Physcomitrella patens moss
Images were acquired on a spinning disk confocal with a Plan Apochromat VC 100x 1.4 NA lens at the Marine Biological Laboratory
Movie courtesy of: Drs. Jeroen de Keijzer and Marcel Janson, Wageningen University, and Dr. Gohta Goshima, Nagoya University.
PFS原理示意
下圖中為使用油鏡時(shí)的原理示意圖。此系統通過(guò)紅外激光確定玻片與液體的交界面,以此為參照進(jìn)行焦點(diǎn)校正。并通過(guò)Offset透鏡調整焦點(diǎn)與參照面間的距離差距。(此系統亦可用于干式物鏡,并可兼容玻璃與塑料培養裝置)

2、高速電動(dòng)控制與拍攝
同步高速控制若干電動(dòng)部件,諸如物鏡轉換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉換器和載物臺,研究者可以進(jìn)行多維電動(dòng)實(shí)驗。更快的附件運動(dòng)和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間,減少相應的光毒性,幫助研究者得到更有意義的數據。使用者可以專(zhuān)注于觀(guān)察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復制觀(guān)察條件,實(shí)現用鼠標控制載物臺,整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

3、可使用高數值孔徑物鏡的高質(zhì)量相差
尼康世界的光學(xué)設計者開(kāi)發(fā)了獨無(wú)二的外部相差單元。使用這革新系統,將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里,使用者不必使用相差專(zhuān)用物鏡來(lái)觀(guān)察相差圖像,并可以通過(guò)高數值孔徑物鏡來(lái)得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到“亮度”的熒光圖像。
置于顯微鏡主體內的相差環(huán)
將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設計,便于使用者使用高數值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據所使用的物鏡,有四種類(lèi)型的相差環(huán)可供選擇(Ti-E/U/S通用)。
4、多層擴展設計多端口支持
具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設計可以在每個(gè)端口連接個(gè)相機。另外分層結構的擴展空間設計可以加入個(gè)后端口,這些特點(diǎn)方便用戶(hù)使用雙層熒光濾色塊盒和多相機進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口。
使用可選的后端口設計擴展了圖像獲取能力。與側端口結合使用可以用兩個(gè)相機獲取雙通道圖像。例如當FRET (福斯特共振能量轉移)的熒光蛋白間有觀(guān)察間隔、CFP和YFP的強度差別很大時(shí),可以通過(guò)調節單個(gè)相機的靈敏度來(lái)得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。
分層結構提高可擴展性
Ti采用的分層結構充分利用了無(wú)限遠光學(xué)系統的優(yōu)勢,另外將PFS整合到物鏡轉換器??梢酝ㄟ^(guò)墊高塊在光路中引入PFS外的兩個(gè)可選部件,利用該系統可以同時(shí)使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動(dòng)熒光濾色塊盒可以單獨控制。
5、***與快速的電動(dòng)控制
非凡的快速圖像獲取
對96孔板進(jìn)行三通道(雙通道熒光和相差)快速拍攝,速度提高2倍以上。
數字控制集線(xiàn)器顯著(zhù)提升了電動(dòng)附件的速度
尼康新研發(fā)的數字控制集線(xiàn)器通過(guò)減少部件間的通訊時(shí)間,提高各附件的速度,進(jìn)而顯著(zhù)提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動(dòng)部件進(jìn)行優(yōu)化,縮短從動(dòng)作命令到移動(dòng)間的反應時(shí)間,從而對整體施行高速控制。 通過(guò)增加智能固件,電動(dòng)部件的整體操作時(shí)間顯著(zhù)縮短,例如三通道(雙通道熒光和相差)連續圖像獲取需要的總時(shí)間大大縮短,減少了對細胞的光毒性。
高速電動(dòng)控制與圖像獲取
同步控制若干電動(dòng)部件,諸如物鏡轉換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉換器和載物臺*,研究者可以進(jìn)行多維電動(dòng)實(shí)驗。更快的附件運動(dòng)和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間,減少相應的光毒性,幫助研究者得到更有意義的數據。
*電動(dòng)載物臺移動(dòng)速度25mm/s、步進(jìn)0.1um、重復精度0.5um(編碼型)3um(非編碼型);熒光濾色塊切換時(shí)間300ms。
提升每個(gè)電動(dòng)部件的速度
操作和/或轉換物鏡、濾光塊、XY載物臺、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加,研究者可以專(zhuān)注于觀(guān)察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復制觀(guān)察條件,實(shí)現用鼠標控制載物臺,整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。
6、各種光學(xué)技術(shù)的完美圖像
尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀(guān)察標本,向研究者呈現細胞的每個(gè)細節。
Nomarski 微分干涉(DIC)
高對比度和高分辨率的平衡對于觀(guān)察細微結構至關(guān)重要。尼康獨有的DIC系統即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊(干)提供高分辨率和高對比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動(dòng)濾光塊盒內,將DIC觀(guān)察和熒光觀(guān)察的切換時(shí)間顯著(zhù)縮短。
相差
相差圖像觀(guān)察時(shí)可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈,增強了圖像的對比度。
暗場(chǎng)
使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場(chǎng)觀(guān)察??梢詫ξ⒘W舆M(jìn)行長(cháng)時(shí)間的觀(guān)察,并避免光漂白。
霍夫曼調制相差(HMC)®
HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類(lèi)似3D的高對比度、無(wú)光暈圖像,可以應用于培養在塑料培養皿中的透明樣本。

7、為T(mén)i系列研發(fā)的新型物鏡
CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物鏡
新研發(fā)的物鏡對近紫外(Ca2+)到近紅外波長(cháng)范圍內的光都有高通透性,并且改進(jìn)了色差校正。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無(wú)色差的圖像。
Plan Apochromat 20x物鏡
新型20x物鏡加入尼康專(zhuān)有的VC物鏡系列,該物鏡的軸向色差校正至405nm,是用于共聚焦觀(guān)察和光活化技術(shù)的理想物鏡。
8、人體工學(xué)設計
用于電動(dòng)操作的所有按鍵和控制轉換器設計都非常人性化,研究者可以不受到顯微鏡操作的影響,專(zhuān)注于研究。
操作按鍵位于顯微鏡主體的兩側和前面
熒光濾色塊的切換、物鏡轉換、Z軸粗/微調、PFS開(kāi)/關(guān)控制、透射照明開(kāi)/關(guān)控制都可以通過(guò)位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。
新研發(fā)的人機學(xué)控制器
通過(guò)手柄或人機學(xué)控制器可以控制高速電動(dòng)X(jué)Y載物臺和Z軸。
顯微鏡主體前面的VFD屏幕和操作按鍵
包括物鏡信息在內的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開(kāi)/關(guān)狀態(tài)都會(huì )顯示在VFD屏上。
遠程控制面板和預設按鍵
通過(guò)遠程控制面板可以操作顯微鏡,并確認顯微鏡目前的狀態(tài)。另外可以通過(guò)預設按鍵來(lái)自動(dòng)切換觀(guān)察條件。只需單單個(gè)按鍵就可以完成從相差到熒光觀(guān)察的切換。
原創(chuàng )傾斜式設計
將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜,操作者眼點(diǎn)與標本間的距離縮短了約40mm,增強了可操作性。
9、三種機型給類(lèi)應用
*Ti-E
旗艦型號具備電動(dòng)與自動(dòng)多模式成像技術(shù)(可選底部端口型號)。
*Ti-U
通用型型號可配置激光照明器與多種電動(dòng)部件(可選底部端口型號)。
*Ti-S
基本型號可用于特定類(lèi)型應用。
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