薄層色譜又叫薄層層析，是色譜法中的***種，常用TLC表示，是***種很重要的能快速分離和定性分析少量物質(zhì)的實(shí)驗技術(shù)，屬固—液吸附色譜，它兼備了柱色譜和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，***方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另***方面在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚加大，因此，又可用來(lái)精制樣品，此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外，薄層色譜法還可用來(lái)跟蹤有機反應及進(jìn)行柱色譜之前的***種“預試”。

薄層色譜法就是將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成***均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開(kāi)后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10×3cm左右）上均勻的涂***層吸附劑或支持劑，帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板***端約1cm處的起點(diǎn)線(xiàn)上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開(kāi)劑的展開(kāi)槽內，浸入深度為0.5cm。待展開(kāi)劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。

薄層色譜具有靈敏度及分辨率高、分離快速、操作方便、同時(shí)分離多個(gè)樣品、樣品預處理簡(jiǎn)單、設備簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。由于這些特點(diǎn)，薄層色譜在實(shí)際工作中的應用十分廣泛。薄層色譜儀即薄層掃描儀，是可以對斑點(diǎn)進(jìn)行掃描的專(zhuān)用分光光度計，用可見(jiàn)光或紫外光作光源，線(xiàn)性?huà)呙杌蜾忼X掃描薄層板展開(kāi)后的斑點(diǎn)，該斑點(diǎn)就吸收該組分特征波長(cháng)的單色光，剩余的單色光經(jīng)透射或反射或發(fā)射熒光，由檢測器積分起來(lái)，獲得這塊斑點(diǎn)面積的待測物質(zhì)含量。

另外，薄層色譜還有相應的條件選擇：

（***）固定相選擇

柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相，分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同。***般用于薄層色譜時(shí)，要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區分為色譜***（用于柱色譜）和薄層色譜***（用于薄層色譜）。

（二）展開(kāi)劑選擇

薄層色譜展開(kāi)劑的選擇和柱色譜***樣，主要根據樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來(lái)考慮。展開(kāi)劑的極性越大，對化合物的洗脫力也越大。選擇展開(kāi)劑時(shí)，除參照表列溶劑極性來(lái)選擇外，更多地采用試驗的方法，在***塊薄層板上進(jìn)行試驗：

1.若所選展開(kāi)劑使混合物中所有的組分點(diǎn)都移到了溶劑前沿，此溶劑的極性過(guò)強；

2.若所選展開(kāi)劑幾乎不能使混合物中的組分點(diǎn)移動(dòng)，留在了原點(diǎn)上，此溶劑的極性過(guò)弱。

當***種溶劑不能很好地展開(kāi)各組分時(shí)，常選擇用混合溶劑作為展開(kāi)劑。先用***種極性較小的溶劑為基礎溶劑展開(kāi)混合物，若展開(kāi)不好，用極性較大的溶劑與前***溶劑混合，調整極性，再次試驗，直到選出合適的展開(kāi)劑組合。合適的混合展開(kāi)劑常需多次仔細選擇才能確定。

（三）相對移動(dòng)值

從點(diǎn)樣原點(diǎn)開(kāi)始到展開(kāi)后的溶劑前沿，是溶劑的移動(dòng)距離，記為lo，混合物中各組分的移動(dòng)距離分別記為l1，l2，l3 …。在不同的展開(kāi)條件下，各化合物的移動(dòng)距離不會(huì )相同，而在同***條件下，相對于展開(kāi)劑的移動(dòng)距離，各化合物有可比較的展開(kāi)數據，稱(chēng)為相對移動(dòng)值，或比移值。在相同條件下測得的比移值可以用于化合物的薄層色譜特征值進(jìn)行比較對照。

（四）顯色

分離的化合物若有顏色，很容易識別出來(lái)各個(gè)樣點(diǎn)。但多數情況下化合物沒(méi)有顏色，要識別樣點(diǎn)，必須使樣點(diǎn)顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線(xiàn)顯色。

1.碘蒸氣顯色：將展開(kāi)的薄層板揮發(fā)干展開(kāi)劑后，放在盛有碘晶體的封閉容器中，升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機物分子形成有色的締合物，完成顯色。

2.紫外線(xiàn)顯色：用摻有熒光劑的固定相材料（如硅膠F，氧化鋁F等）制板，展開(kāi)后在用紫外線(xiàn)照射展開(kāi)的干燥薄層板，板上的有機物會(huì )吸收紫外線(xiàn)，在板上出現相應的色點(diǎn)，可以被觀(guān)察到。