***、更換前的準備

　　1. 確認新柱規格

　　- 核對新色譜柱的型號、填料類(lèi)型(如C18、硅膠基質(zhì)等)、粒徑(如5 μm、3 μm)、孔徑、pH耐受范圍及流速上限，確保與原有系統兼容。

　　- 檢查流動(dòng)相體系是否與新柱匹配(如反相柱需避免使用強堿性流動(dòng)相)。

　　2. 工具與材料準備

　　- 專(zhuān)用扳手(用于擰緊柱接頭)、清潔紙巾、廢液容器、適合的流動(dòng)相(如甲醇、乙腈或超純水)。

　　- 若使用UHPLC系統，需確認新柱的壓力耐受值(通?！?00 bar)。

　　3. 系統狀態(tài)檢查

　　- 記錄當前系統的運行參數(如流速、壓力、波長(cháng)等)，以便更換后對比。

　　- 提前配制足量的新流動(dòng)相，并脫氣處理。

　　二、停機與舊柱拆卸

　　1. 停機操作

　　- 停止泵運行，關(guān)閉檢測器(如UV燈)、自動(dòng)進(jìn)樣器等模塊電源，避免系統壓力突變導致液體噴濺。

　　- 打開(kāi)排泄閥，釋放系統內殘余壓力。

　　2. 拆卸舊柱

　　- 斷開(kāi)入口端接頭：用扳手逆時(shí)針擰動(dòng)入口管路螺母，小心取下管路，避免液體灑出。

　　- 標記方向：記錄舊柱標簽上的流向箭頭(通常為“IN”和“OUT”)，確保新柱安裝方向***致。

　　- 取出舊柱：垂直向上拔出色譜柱，避免碰撞柱管導致物理?yè)p傷。

　　- 清理接頭：用甲醇或異丙醇擦拭舊柱兩端的接頭，清除殘留顆?；蚓彌_鹽。

　　三、新柱安裝與系統重啟

　　1. 安裝新柱

　　- 檢查密封墊：確認柱兩端的密封墊(如PEEK或不銹鋼材質(zhì))無(wú)破損，必要時(shí)更換。

　　- 對齊方向：嚴格按照“IN”端接泵、“OUT”端接檢測器的方向安裝，裝反會(huì )導致分離失效。

　　- 擰緊接頭：用手將管路螺母旋至接觸柱體，再用扳手輕壓至密封(通常1/4~1/2圈)，避免過(guò)度用力導致柱頭損壞。

　　2. 系統沖洗與平衡

　　- 初始流速：以較低流速(如0.2~0.5 mL/min)通入新流動(dòng)相，排出柱內空氣。

　　- 梯度平衡：若舊流動(dòng)相與新柱不兼容(如從含緩沖鹽切換至純有機相)，需分段過(guò)渡(如先用甲醇沖洗，再切換至目標流動(dòng)相)。

　　- 基線(xiàn)穩定：持續沖洗15~30分鐘，直至檢測器基線(xiàn)平穩(UV噪聲<0.5 mAU)，壓力值正常。

　　四、性能驗證與參數優(yōu)化

　　1. 測試分離效果

　　- 注入標準樣品(如萘、甲苯等非保留物質(zhì)或目標分析物)，檢查峰形是否對稱(chēng)、柱效(以塔板數衡量)是否達標。

　　- 對比新舊柱的保留時(shí)間、分離度及理論塔板數，確認新柱性能恢復。

　　2. 調整運行參數

　　- 根據新柱特性微調流速(如粒徑更小的填料需降低流速)、柱溫或梯度程序。

　　- 避免超過(guò)新柱的壓力上限(如常規C18柱壓力限制為40~60 bar)。

　　五、注意事項與常見(jiàn)故障處理

　　1. 關(guān)鍵操作禁忌

　　- 禁止反向安裝：裝反會(huì )導致固定相流失、柱壓驟升甚至堵塞。

　　- 避免干柱狀態(tài)：柱內無(wú)流動(dòng)相時(shí)切勿運行泵，否則會(huì )損壞填料。

　　- 慎用強酸/堿：超出柱子pH耐受范圍(如硅膠柱pH 2~8)會(huì )加速填料溶解。

　　2. 典型問(wèn)題排查

　　- 壓力異常：若新柱壓力遠高于舊柱，檢查接頭是否漏液、填料是否堵塞或流速設置過(guò)大。

　　- 峰形拖尾：可能因流動(dòng)相未充分平衡、樣品過(guò)載或舊柱污染殘留。

　　- 氣泡問(wèn)題：系統重啟后需排氣，可通過(guò)快速沖洗或超聲波處理消除。

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