孔板成像好方法 — 真彩色白光透射
孔板成像是分子生物實(shí)驗中必不可少的實(shí)驗方案,其中孔板成像還可以用于病毒噬菌斑的計算和計數。
其主要的原理是將各稀釋度的病毒液接種到單層細胞培養環(huán)境中,吸附***段時(shí)間后,在單層細胞上覆以瓊脂糖,病毒感染細胞并在細胞中增殖,使細胞破裂死亡。由于固體介質(zhì)的限制,釋放的病毒只能由***初感染的細胞向四周擴展。經(jīng)過(guò)幾個(gè)增殖周期,便形成***個(gè)局限性病變細胞區,即病毒蝕斑。經(jīng)中性紅活細胞染料著(zhù)色后,活細胞顯紅色,而蝕斑區細胞而不著(zhù)色,形成不染色區域。病毒蝕斑如噬菌體感染細菌形成的噬菌斑。理論上,當病毒液充分稀釋后,獲得的每個(gè)蝕斑均源于***初感染細胞的***個(gè)病毒顆粒,即蝕斑中的病毒為***個(gè)病毒體的繁殖后代品系,由此達到純化病毒的目的。除了可用于純化病毒以外,空斑實(shí)驗還可用于干擾素、抗體中和病毒繁殖能力的實(shí)驗。
而目前該類(lèi)實(shí)驗主要采用顯微鏡成像的方式進(jìn)行觀(guān)察和記錄。新***代的多功能生物分子成像設備Amersham ImageQuant 800能夠利用白光透射模式,對孔板中的病毒噬菌斑進(jìn)行真彩色成像光密度***定量和自動(dòng)化數據分析。
顯微鏡的拍照雖然方便,但是儲存數據和做定量分析非常麻煩。??
成像小助手可以幫助大***更好地得到和分析結果。采用新***代的多功能生物分子成像設備Amersham ImageQuant 800,它能夠利用白光透射模式,對噬菌斑進(jìn)行真彩色成像光密度***定量和數據分析。??
具體操作步驟:
1
打開(kāi)設備,選擇OD measurement OD模式:選用OD白光透射托盤(pán)直接拍照即可得到結果。
2
機器會(huì )自動(dòng)保存真彩色圖片和TIF圖,以及TIF圖轉換為OD值精確定量。
3
打開(kāi)IQTL高***多功能分析軟件進(jìn)行孔板等面積定量***分析即可。
(文章來(lái)源于儀器網(wǎng))