由沙門(mén)菌引起的感染性疾病是***個(gè)世界性健康難題，對全球特別是發(fā)展中******構成嚴重威脅，被世界衛生組織列為具有嚴重危害或中等危害的食源性病原菌。

由不同血清型沙門(mén)菌引發(fā)的疾病類(lèi)型會(huì )有所差異，沙門(mén)菌血清型的準確快速鑒定對暴發(fā)流行中的溯源分析具有重要意義。

***近看到***篇由王雅靜，管紅霞，沙丹等撰寫(xiě)的專(zhuān)業(yè)論文《實(shí)時(shí)熒光PCＲ檢測技術(shù)在沙門(mén)菌血清鑒定中的應用》，研究對比實(shí)時(shí)熒光PCＲ法和傳統的玻片凝集法在實(shí)驗操作、檢測成本及靈敏度等方面的差異，了解實(shí)時(shí)熒光PCＲ 檢測技術(shù)在沙門(mén)菌血清分型中的實(shí)際應用價(jià)值。

研究方法

研究結果

144 株沙門(mén)菌利用傳統玻片凝集法均可分型，共鑒定出 28 個(gè)型別。兩種方法鑒定結果***致的有 134 株菌，符合率為93. 06%，Kappa 值為 0. 68，具有高度***致性。

采用實(shí)時(shí)熒光 PCＲ 法鑒定沙門(mén)菌血清型，結果與金標準的玻片凝集法具有高度***致性。有10 株菌株檢測結果與玻片凝集法不***致，可能與致病菌自身部分待測基因環(huán)境或宿主的改變發(fā)生突變，進(jìn)而基因組呈現多樣性有關(guān)。

4 種沙門(mén)菌優(yōu)勢血清型兩種方法分型結果完全***致，且此血清型分布與 2017年無(wú)錫市食品行業(yè)從業(yè)人員沙門(mén)菌血清分布基本***致。

玻片凝集法VS實(shí)時(shí)熒光PCＲ法

玻片凝集法直觀(guān)且可靠性高，是目前公認的沙門(mén)菌血清分型金標準。但耗時(shí)長(cháng)，操作過(guò)程復雜，需嘗試的血清診斷試劑較多，鑒定成本高，常要受制于試劑種類(lèi)與質(zhì)量?jì)?yōu)劣，且需多次誘導時(shí)具有***定鑒定難度。

部分粗糙型自凝性沙門(mén)菌利用玻片凝集法不能進(jìn)行分型。個(gè)別情況下沙門(mén)菌的抗原與血清凝集反應程度較弱，對實(shí)驗人員經(jīng)驗和操作水平要求高。

實(shí)時(shí)熒光PCR法是基于目標基因簇中特定區域或基因片段，操作簡(jiǎn)單，不易出現差錯，對普通實(shí)驗人員來(lái)說(shuō)從分離培養、提取核酸到檢測、記錄 Ct 值、確定血清分型***多僅需要 1 d，且常規的***塊 96 孔 PCＲ 板可以同時(shí)檢測 8 份樣本，極大縮短了檢測時(shí)間。

但實(shí)時(shí)熒光 PCＲ 法對***些不常見(jiàn)、存在交叉情況的血清型鑒定時(shí)，尚無(wú)法準確判斷沙門(mén)菌血清型。

實(shí)時(shí)熒光 PCＲ 法成本為 100 元/份，操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)僅 1 d; 玻片凝集法成本為 300 元/份，操作復雜，耗時(shí) 3～5 d。