高速逆流色譜簡(jiǎn)稱(chēng)HSCCC，是***種液-液色譜分離技術(shù)，它的固定相和流動(dòng)相都是液體，沒(méi)有不可逆吸附，具有樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)廣泛應用于生物醫藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域，特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認為是***種有效的新型分離技術(shù)，適合于中小分子類(lèi)物質(zhì)的分離純化。

高速逆流色譜儀利用液液兩相的逆流分配，在沒(méi)有固體填料、不需使用固態(tài)固定相的情況下，而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的***系列的腔體中，實(shí)現復雜化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相，螺旋柱在行星運動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的離心力，使互不相溶的兩相不斷互相混合，同時(shí)保留其中的***相，使用恒流泵連續輸入另***相，樣品溶質(zhì)在兩相之間反復分配，按分配系數的次序，被依次洗脫出來(lái)，它替代了傳統制備型高效液相色譜的填充柱。

那在選購***臺高速逆流色譜儀的時(shí)候，哪些指標是衡量其性能的關(guān)鍵指標呢？

（***）固定相保留率

由于高速逆流色譜儀的固定相是液體，在分離過(guò)程中如何將液體固定相***直保留在里面，是所有生產(chǎn)廠(chǎng)***和使用者***關(guān)心的問(wèn)題，它是由儀器的本身性能決定的，它與公轉半徑、自轉半徑、旋轉速度等因素有關(guān)，也與流動(dòng)相的流速有關(guān)聯(lián)，與溶劑體系關(guān)系不大；***好設備的固定相保留率可以達到90%；***般設備的固定相保留率為50%。

如果設備的固定相保留率較低，則對兩相溶劑體系的選擇和配比要求就高，使用者就需要不斷調整溶劑配比，進(jìn)行多次實(shí)驗摸索，找到***佳的配方，以提高樣品的分離度，才能將樣品中的多個(gè)成分分離出來(lái)；如果設備的固定相保留率很高，對兩相溶劑體系的選擇和配比要求就十分寬松，稍微調整就能將樣品中的多個(gè)成分分離出來(lái)，更為重要的是有些樣品只有在高的固定相保留率下才能分開(kāi)，固定相保留率低就無(wú)能為力了。

（二）線(xiàn)圈的數量和柱體積

近幾年動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)大幅提高，***先實(shí)現了每個(gè)線(xiàn)圈可以獨立繞制就能平衡，其次完成了多個(gè)線(xiàn)圈混合繞制，***終實(shí)現了***臺儀器上可以放置多個(gè)線(xiàn)圈的夢(mèng)想，經(jīng)常配置兩個(gè)線(xiàn)圈或四個(gè)線(xiàn)圈。

柱體積是由線(xiàn)圈的直徑和長(cháng)度決定的，其大小影響到上樣量的多少，合理的配置柱體積可以覆蓋大部分樣品的制備。如果條件允許，配置4個(gè)不同柱體積的線(xiàn)圈，使用起來(lái)將更方便，能實(shí)現線(xiàn)圈之間的串并聯(lián)，從而提高樣品的分離效果和分離能力。

（三）線(xiàn)圈的材質(zhì)

高速逆流色譜儀的線(xiàn)圈材質(zhì)***般使用PTFE材料，它耐酸耐堿，同時(shí)適合所有的有機溶劑，材質(zhì)價(jià)格也便宜，重量較輕，很容易實(shí)現動(dòng)態(tài)平衡，但唯***缺點(diǎn)是耐壓較低，在高速旋轉的情況下，工作壓力超過(guò)10bar或者線(xiàn)圈出口堵塞，PTFE線(xiàn)圈就有可能爆裂，產(chǎn)生溶劑泄漏；***旦發(fā)生內部線(xiàn)圈爆裂，對設備將是毀滅性的，修復的成本是十分昂貴的；采用316不銹鋼制作線(xiàn)圈，是近幾年動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)大幅提高以后才出現的，徹底解決了高速逆流色譜儀耐壓低的缺陷，工作壓力可以承受1000bar，由于316不銹鋼材質(zhì)較重，成本高，線(xiàn)圈繞制難度大，動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)要求高，從而導致儀器整體價(jià)格偏高；鈦合金是近幾年出現的***種新型材料，它克服了316不銹鋼材質(zhì)較重的缺點(diǎn)，對動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)要求不高，但鈦合金材質(zhì)的價(jià)格比316不銹鋼要貴出很多，是三種材質(zhì)中的儀器價(jià)格***貴的。

除此之外，設備的各個(gè)安全保護功能，進(jìn)樣六通閥，以及不同體積的樣品定量環(huán)是高速逆流色譜儀必須配置的，以便于今后的安全保障和使用方便。

高速逆流色譜在天然產(chǎn)物有效成分的分離純化領(lǐng)域中有著(zhù)獨特的優(yōu)勢，還可以實(shí)現多種形式的梯度洗脫過(guò)程，既可用于天然植物粗提物的去除雜質(zhì)，也可用于***后產(chǎn)物的精制，甚至直接從未經(jīng)處理的粗提物***步純化得到純品。隨著(zhù)越來(lái)越多的研究者的加入，高速逆流色譜將得到更加廣泛的應用和發(fā)展。